《表3 LAMP反应体系条件优化》

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《LAMP实时浊度法快速检测大肠杆菌方法的建立与优化研究》

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LAMP反应体系由内引物（FIP/BIP）、外引物（F3/B3）、环引物（loopB/loopF）、Bst DNA聚合酶、LAMP Buffer缓冲液、dNTPs、甜菜碱、双蒸水（ddH2O）和目标核酸组成。本研究通过固定某些反应参数，如选用1μL浓度为0.2μmol/L的F3/B3，1μL浓度为1.6μmol/L的FIP/BIP，Bst DNA聚合酶用量为1μL，LAMP Buffer缓冲液用量为2.5μL，DNA模板用量为2μL，补充ddH2O至反应体系总体积为25μL；然后对反应温度、环引物的浓度、dNTPs（浓度为10 mmol/L）及甜菜碱（浓度为4 mol/L）体积用量等条件进行优化（见表3），确定最佳反应体系。