《表1 FNA-PCR反应体系和条件优化引物浓度梯度表》

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分别以野生型和编辑杂合型(+/-)样品基因组DNA为模板进行PCR反应体系和条件的优化,引物终浓度梯度如表1,并设置退火温度为60℃、61℃、62℃、63℃4个梯度,三条引物添加在同一体系进行扩增。PCR反应程序为:94℃5 min;94℃30 s,60℃30 s,72℃30 s,共35个循环;72℃5 min。PCR产物用2.5%的琼脂糖凝胶电泳进行鉴定。