《表1 常见壳聚糖生产的接合真菌》

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《生物法制备甲壳素/壳聚糖的研究进展》

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近些年来，利用菌种发酵生产壳聚糖的研究得到了越来越多的关注，如黑曲霉、酵母、甘格氏菌、毛霉菌和根霉菌等[59-60]。表1中汇总了常见的接合真菌生产壳聚糖的产量和脱乙酰化程度。研究人员对几种不同真菌的生产潜力进行了评估。Pochanavanich等[61]考察了真菌Aspergillus niger、Rhizopus oryzae、Lentinus edodes、Pleurotus sajocaju、Zygosaccharomyces rouxii TISTR5058和Candida albicans TISTR5239在复合培养基中生产壳聚糖的能力。从上述菌株中分离出来的壳聚糖产量为10-140 mg/g细胞干重，脱乙酰度为84%-90%，分子量2.7×104-1.9×102 kD，黏度是3.1-6.2 cP。Rane等[62]研究了菌种Absidia.Coerulea、Absidia blakesleeana、G.butleri、Mucor rouxii和Phvcomyces blakesleeanus在简单的酵母提取物-蛋白胨-葡萄糖培养基中壳聚糖的生产，结果表明Absidia.coerulea壳聚糖最大产量为510 mg/L（培养48 h），脱乙酰度为94%，当介质中添加钴元素后，壳聚糖产率可增加20%。Muzzarelli等[63]进一步优化了培养条件，Absidia.coerulea培养72 h生物质产量为6-7 g干重/L，其中壳聚糖约占30%即1.8 g/L，脱乙酰率为95%，平均分子量为500 kD。Kim等[64]进一步报道Absidia.coerulea在pH 4.5，搅拌速度250 r/min和曝气率2vvm等优化条件下可连续生产壳聚糖，产率可到52mg/L/h。Tasara等[66]系统研究了采集于土耳其埃尔祖鲁姆地区的菌种Rhizopus oryzae PAS 17（基因库登录号KU318422.1）在非无菌条件下发酵生产壳聚糖，利用其可以在较低温度和pH条件下生长的特性以抑制其他微生物的污染。通过正交实验优化了对壳聚糖生产影响最明显的五个因素，分别是碳源（糖蜜）、金属离子（Mg2+）、接种量、转速和培养时间，得到最优的培养条件:糖蜜70 mL/L，MgSO4·7H2O 0.5g/L，接种量6.7×106孢子/瓶，搅拌速度150 r/min，培养时间8 d。结果显示，壳聚糖和生物量产量分别是未优化实验的14.45和8.58倍。