《表2 LAMP反应体系：基于ipaH基因的志贺菌LAMP检测方法的建立及应用》

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《基于ipaH基因的志贺菌LAMP检测方法的建立及应用》

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依照Lopamp?脱氧核糖核酸扩增试剂盒推荐的体系建立志贺菌LAMP检测方法。LMAP反应体系见表2，外引物，环引物和内引物浓度比例为1:4:8，总体系为25μL。反应时间控制在30～60 min之内。反应程序：60℃反应60 min，80℃灭活5 min。因Bst DNA聚合酶的最适温度在60～65℃之间，试验在60～65℃之间设置温度梯度，摸索反应最佳温度。按照试剂盒推荐的体系使用实时浊度仪进行LAMP扩增，80℃灭活5 min后，将LAMP产物进行琼脂糖凝胶电泳鉴定。