《表3 LAMP反应体系》

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《隐孢子虫LAMP检测方法的建立及其在牦牛中的应用》

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通过优化反应条件，隐孢子虫LAMP反应体系为25μL:F3、B3引物（10 mmol/L）各0.25μL，FIP、FBP引物（10 mmol/L）各2μL，LP、LB引物（10mmol/L）各1μL，MgCl2（25mmol/L）1.5μL，dNTP Mixture（2.5 mmol/L）3.5μL，Bst DNA聚合酶（8U/μL）1μL，10×Themopol reaction buffer1.5μL，DNA模板2μL，超纯水补足25μL。反应体系终浓度见表3。扩增条件:反应混合物先在95℃水浴加热5 min，置于冰上冷却5 min，加Bst大片段DNA聚合酶，然后65℃孵育60min，最后80℃加热10min终止反应（表3）。