《表1 木糖酶标准曲线反应体系》

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木糖标准曲线反应体系见表1。依据酶活筛选结果，选取已测序Xylanase-MF3阳性克隆作酶学活性分析。样品经超声波破碎，离心收集上清液，过滤（孔径0.22μm），作为Xylanase-MF3酶活测定粗酶液，4℃保存。磷酸氢二钠-柠檬酸配制pH梯度为3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、7.0、8.0缓冲液，制备相应0.5%木聚糖底物溶液，测定40℃水浴条件下木聚糖酶活，确定木聚糖酶活最适pH；最适pH下分别在20、30、35、40、45、50、60和70℃条件下测定木聚糖酶活性，确定木聚糖酶最适温度。根据酶活定义，按照公式A=W×N/（M×T×V），其中A为酶活力单位（U·mL-1）；W为公式中相应的木糖质量（μg）；N为稀释倍数；T为体系反应时间（min）；M为木糖分子量，150.15；V为样品用量（mL）。