《Table 1 TRI1-GFP and H1-RFP vector construction prim ers》
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《FAC1基因对禾谷镰刀菌的菌丝膨大处细胞核分裂的影响》
pFL2质粒被用于TRI1-GFP载体构建,pXY201质粒被用于H1-RFP载体构建。从赤霉基因组数据库中下载TRI1和H1基因的完整序列,利用DNAman和Primer premier 5.0设计带有GFP和RFP同源序列的引物,以PH-1基因组为模板,分别用引物TRI1-GFP-F/TRI1-GFP-R和H1--RFP-F/H1--RFP-R克隆完整的TRI1和H1基因序列,将克隆的TRI1和H1基因经切胶纯化后,分别与用Xho I内切酶酶切后的p FL2质粒(含有编码geneticin (G418)基因序列) 和PXY201质粒(含有编码博来霉素 (Zeocin)基因序列) 共转入酵母菌株XK1-25中使目的基因与质粒融合,分别通过G418以及Zeocin抗生素筛选出带有抗性基因的转化子,经菌落PCR检测得到条带正确的阳性转化子,提取阳性转化子酵母质粒后转入大肠杆菌Escherichia coli感受态细胞中,经菌落PCR鉴定后,将筛选到的阳性克隆菌株送至北京奥科公司测序(表1)。
图表编号 | XD0049074300 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.04.01 |
作者 | 原康怡、巩晨、江聪、王晨芳 |
绘制单位 | 西北农林科技大学植物保护学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室、西北农林科技大学植物保护学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室、西北农林科技大学植物保护学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室、西北农林科技大学植物保护学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室 |
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