《表1 PCR扩增引物及条件》
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《DACT1基因羟甲基化在儿童WT1、IDH1/2、TET2基因突变的急性髓细胞白血病中的特征及临床意义》
用KOD酶扩增WT1基因(NM_024426)7、9外显子,PCR循环条件为:95℃3 min;98℃10 s,退火30 s,68℃45 s,共35个循环;68℃5 min;用Taq酶扩增TET2(NM_001127208)第11号外显子、IDH1(NM_005896.3)和IDH2(NM_002168.3)第4号外显子,循环条件为:95℃4 min;95℃10 s,退火20 s,72℃40 s,共35个循环;72℃5 min。PCR扩增产物经2%琼脂凝胶电泳鉴定后送至北京华大公司进行测序。DNAMAN软件比对测序结果的文本序列与NCBI数据库参考序列碱基有不一致或Chromas软件所读测序峰图出现同一轴线套峰时判读为DNA序列改变,有改变的病例反向测序验证。基因引物用Primer 5.0软件设计,由北京华大基因公司合成,PCR序列见表1。
图表编号 | XD0048757800 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.02.28 |
作者 | 闭军琴、包黎明、王兴娟、豆虎、杨珍珍、于洁、陈希 |
绘制单位 | 重庆医科大学附属儿童医院临床分子医学中心、重庆医科大学附属儿童医院临床分子医学中心、重庆医科大学附属儿童医院临床分子医学中心、重庆医科大学附属儿童医院临检中心、重庆医科大学附属儿童医院临床分子医学中心、重庆医科大学附属儿童医院血液科、重庆医科大学附属儿童医院临床分子医学中心 |
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