《表1 qPCR引物序列Tab.1 Primer sequences for qPCR》

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《KRAS基因突变与分化型甲状腺癌~(131)I放疗耐受性及预后的关系》

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使用TRIzol试剂提取DTC癌组织和癌旁组织标本及细胞总RNA。测定总RNA浓度及纯度后，用逆转录试剂盒逆转录合成cDNA，置于-80℃冰箱冷冻保存备用。以GAPDH作为内参，qPCR引物见表1。用荧光定量PCR扩增仪检测p21 mRNA表达水平，反应体系及条件:2×SYBR Premix 10μl，0.8μl ddH2O，1μl cDNA，PCR上游和下游引物各0.5μl，95℃预变性30 s，95℃20 s，60℃30 s，共40个循环。采用2-△△Ct计算基因的相对表达量，每个样本设3个复孔，实验重复3次。