《表1 实时定量PCR的引物》

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《重组人白细胞介素-1受体拮抗剂对急性肝衰竭小鼠肝脏保护作用的评价》

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采用总RNA抽提试剂盒从小鼠新鲜肝组织中纯化总RNA。用2μg的总RNA作为模板，采用多聚脱氧胸腺嘧啶（oligo dT13）作为引物，对RNA进行逆转录，将合成后的cDNA作为荧光定量PCR的模板，根据SYBR荧光定量PCR试剂盒推荐的条件进行荧光定量PCR（95℃预变性30 s；PCR循环40次；95℃，5 s；60℃，30 s）。NOS2和IL-6是调控肝损伤的2个重要细胞因子，本试验分别检测了二者在模型组、低剂量组和高剂量组小鼠肝脏组织中的mRNA水平变化。引物采用美国国家生物技术中心（NCBI）的在线引物设计工具primer BLAST（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primerblast/）在线设计，实时定量PCR的引物见表1。