《表1 实时定量PCR所使用引物》

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《基于高通量测序筛选‘紫娟’花青素合成相关的miRNA》

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从测序获得的差异表达miRNA中随机选取8个miRNA进行实时荧光定量PCR测定，以参考文献[21]中pc-3p-222基因作为参考基因（表1）。采用Trizol试剂提取总RNA，按照Thermo公司的RevertAid Premium Reverse Transcriptase（Thermo Scientific?）说明书合成cDNA。实时荧光定量PCR的反应程序为95℃3 min；95℃3 s，60℃30 s，72℃30 s，45个循环。设技术重复3个，采用2-(35）（35）CT法计算基因相对表达量。