《表1 亲和层析参数筛选试验因素及水平设计Tab 1.Factors and levels for screening of parameters of affinity chromatography
采用DOE方法对Mabselect SuRe亲和层析参数进行筛选,通过DOE的中心复合表面(Central Composite Face,CCF)设计及二次方(quadratic)模型,共进行11次亲和层析纯化,包括3次中心点重复,考察亲和层析中间清洗液NaCl浓度在130~870 mmol/L、洗脱液pH在3.50~4.20之间变化对纯化后重组抗CD52单克隆抗体样品纯度、收率、残余宿主蛋白、外源DNA及蛋白A含量的影响,试验因素及水平设计见表1。检测结果输入Avant层析系统的Unicore 6.1软件,经DOE模块构建数据模型并进行分析,预测各响应值符合预期情况下中间清洗液NaCl浓度和洗脱液p H的参数范围。模型方差分析中,当模型的回归P<0.05且模型失拟P>0.05时,表明参数的模型与检测结果之间拟合较好。模型参数分析中,R2代表当前数据与模型是否拟合,应>0.75;Q2代表模型与数据的可预测性,应>0.50;模型有效性(model validity)代表模型误差(model error)和纯误差(pure error)间的关系,应>0.25;重现性(reproducibility)代表纯误差,应>0.50[6]。
图表编号 | XD0041632900 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.04.20 |
作者 | 陈继军、南建军、乔玉玲、张超、宋兰兰、熊颖、安晨、房世娣、毛晓燕 |
绘制单位 | 兰州生物制品研究所有限责任公司第四研究室甘肃省疫苗工程技术中心、兰州生物制品研究所有限责任公司第四研究室甘肃省疫苗工程技术中心、兰州生物制品研究所有限责任公司第四研究室甘肃省疫苗工程技术中心、兰州生物制品研究所有限责任公司第四研究室甘肃省疫苗工程技术中心、兰州生物制品研究所有限责任公司第四研究室甘肃省疫苗工程技术中心、兰州生物制品研究所有限责任公司第四研究室甘肃省疫苗工程技术中心、兰州生物制品研究所有限责任公司第四研究室甘肃省疫苗工程技术中心、兰州生物制品研究所有限责任公司第四研究室甘肃省疫苗工程技术中心 |
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