《表1 RT-PCR特异性引物序列》

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《miR-195靶向调控CHEK1对非小细胞肺癌细胞增殖、转移及侵袭的作用》

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使用Trizol试剂对未转染的A549、H1299、H1975细胞与转染后48 h的各组细胞进行总RNA的提取，使用紫外分光光度计对RNA的浓度进行检测，使用试剂盒将总RNA转录成cDNA，转录方法按照厂商试剂盒说明书进行操作。使用转录后的cDNA进行PCR扩增，PCR扩增体系按照说明书进行配置。PCR反应条件:95℃预变性10 min，95℃变性30 s，60℃退火30 s，74℃延伸30 s，共进行40次循环，本次研究采用ABI7900实时PCR扩增仪进行实时荧光定量PCR检测，使用U6作为内参，各组相对表达量使用2-ΔΔCt计算，对每个样品进行3次反应。引物序列见表1。