《表4 黑麦基因组SCAR标记引物》

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《小麦-黑麦1RS-1BS/1BL小片段易位系抗赤霉病鉴定及分子细胞遗传学分析》


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利用黑麦基因组SCAR引物和黑麦1RS SCAR引物(表4),检测材料中是否含有黑麦遗传物质。PTC-200扩增仪器扩增,20μL反应体系包括:10x Buffer、d NTP(2.5μmol/m L)、引物(2.5μmol/m L)、模板DNA(100 ng/μL)各2μL,Taq酶(5 U/μL)0.2μL,dd H2O 11.8μL。反应程序:95Ⅲ条件下预热变性5 min,退火温度见下表4,退火时间50 s,在72Ⅲ下延伸1 min,程序反应35~40个循环,72Ⅲ补平10 min,最后程序反应结束后产物4Ⅲ保存。PCR产物使用1%琼脂糖凝胶进行电泳,电泳后用凝胶成像仪拍照。