《表1 本研究所用样品的名称、凭证标本和序列登录号》
注:本研究获得的序列以粗体表示
新增标本的DNA提取、PCR以及序列测定参照Fan et al.(2016)和Huang et al.(2017)的方法进行。采用CTAB法(Gardes&Brun 1993)提取担子果干标本总DNA后,扩增核糖体DNA内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)片段,PCR扩增引物为ITS1-F/ITS4(Gardes&Brun1993),扩增条件为:94℃预变性3min,94℃变性30s,53℃退火45s,72℃延伸1min,35个循环,最后72℃延伸10min;扩增核糖体大亚基(nuclear large subunit rDNA,28S nrDNA)序列,PCR扩增引物为LROR/LR5(White et al.1990),扩增条件为95℃预变性4min,94℃变性1min,55℃退火1min,72℃延伸1min,35个循环,最后72℃延伸10min;扩增核糖体小亚基(nuclear small subunit rDNA,18S nrDNA)序列,PCR扩增引物为PNS1/NS8(White et al.1990;Hibbett 1996;Rehner&Buckley 2005),扩增条件为94℃预变性3min,94℃变性1min,55℃退火45s,72℃延伸1min,35个循环,最后72℃延伸10min;扩增延伸因子tef1(translation elongation factor 1α,tef1)序列,PCR扩增引物为EF1-983F/EF1-1567R(Rehner&Buckley 2005),扩增条件为95℃预变性10min,94℃变性30s,57℃退火30s,72℃延伸1min,35个循环,最后72℃延伸10min;扩增RNA聚合酶II第二大亚基(second-largest subunit of RNA polymerase II,rpb2)序列,PCR扩增引物为b6f/b7.1R9(Matheny 2005),扩增条件为95℃预变性3min,95℃变性1min,55℃退火2min,72℃延伸2min,30个循环,最后72℃延伸10min。PCR产物经纯化和测序(北京中科希林生工生物技术有限责任公司)获得的序列经手工校对后,于GenBank进行比对和注册序列号(表1)。
图表编号 | XD00222836100 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.09.22 |
作者 | 李素玲、刘虹、郭丽杰、范黎 |
绘制单位 | 山西省农业科学院食用菌研究所、山西省农业科学院食用菌研究所、首都师范大学生命科学学院、首都师范大学生命科学学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |