《表1 基因引物序列：罕见同卵双胞胎侵袭性牙周炎患者易感基因研究》

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《罕见同卵双胞胎侵袭性牙周炎患者易感基因研究》

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运用聚合酶链式反应-限制性内切酶多态性（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP）法对筛选出的6个目标易感基因进行鉴定，包括白细胞介素1β-511（interleukin-1 beta-511，IL-1β-511）、白细胞介素1β+3953(interleukin-1 beta+3953，IL-1β+3953）、肿瘤坏死因子-α-308(tumor necrosis factor alpha-308，TNF-α-308）、Fcγ受体-IIIb(Fc gamma receptor-IIIb，FcγR-IIIb）、维生素D受体（vitamin D receptor，VDR）、雌激素受体（estrogen receptor，ER）[5，10]。运用NCBI数据库Primer-BLAST进行引物设计和验证，引物由上海生工合成，序列见表1。按照说明书取上述模板DNA 2μL，加入各基因上下游引物2μL，总反应体积为50μL，然后行PCR循环，循环参数：94℃预变性5 min；94℃变性40 min，58℃退火30 s，72℃延伸40 s，循环35次；72℃延伸10 min，4℃保存产物。应用限制性内切酶法进行PCR产物鉴定，取PCR产物5μL，加入各目的基因特定限制性内切酶，总反应体积20μL，37℃水浴过夜，1.5%琼脂糖凝胶电泳（100 V，60 min），溴化乙锭染色后自动凝胶成像分析仪采集图片。