《表1 RT-q PCR的引物序列》

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《子痫前期患者胎盘组织中microRNA-205-5p的表达及其对血管内皮生长因子A的影响》

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应用TRIzol试剂盒按说明书操作抽提胎盘组织中总RNA，mi RNA提取分离试剂盒提取mi RNA。将抽提的总RNA和mi RNA逆转录成c DNA后进行荧光定量PCR(RT-q PCR）。VEGFA依据Quanti NovaTMSYBR?Green PCR Kit试剂盒说明书进行PCR反应，反应条件设定：95℃预变性5 min；然后40个循环95℃变性15 s、60℃退火30 s、72℃延伸25 s；最后95℃变性15 s、60℃退火60 s、95℃延伸30 s，以GAPDH作为内参。mi R-205-5p依据mi Script SYBR Green PCR Kit试剂盒说明书进行PCR反应，反应条件设定：95℃预变性15 min；然后40个循环95℃变性15 s、60℃退火30 s、72℃延伸30 s，以U6作为内参。引物序列见表1。根据系统生成的样本拷贝数，采用2-△△CT法进行分析，计算mi R-205-5p和VEGFA m RNA相对表达量。