《表1 引物序列：前期低氧处理对梨虎皮病的防控及乙烯释放的影响》

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《前期低氧处理对梨虎皮病的防控及乙烯释放的影响》

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结合Xie等（2014）研究结果初步筛选虎皮病相关乙烯生物合成及信号转导基因，特异定量引物序列参考慕茜（2015）的报道（表1），委托上海生工生物工程有限公司合成引物序列。参照SG Fast q PCR Master Mix（2X）(Roche罗氏）说明书，建立总体积为20μL的实时荧光定量PCR反应液，包含10μL的2×SYBRGreen q PCR Master Mix，各0.4μL的上、下游引物，7.2μL的dd H2O，2μL的模板。在Light Cycler480 Software Setup(Roche罗氏）荧光定量PCR仪上进行扩增：95℃预变性3 min；95℃变性7 s，57℃退火10 s，72℃延伸15 s，45个循环。PCR循环结束立即进行熔解程序。在Eppendorf的Mastercycler?eprealplex软件中自动生成标准曲线、熔解曲线和样品Ct值。每个样品重复3次。采用2-??Ct法计算相关基因在各样品中的相对表达量。