《表2 碱加热法正交试验设计》

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《木薯叶蛋白提取方法的筛选》

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碱加热法使用0.2%的Na OH溶液调节备用汁液的p H值至7、8、9、10、11、12，加热温度分别为25、60、70、80、90℃，加热时间分别为2、4、6、8、10 min。取5个处理水平，按正交表L25(53）进行正交试验，每次取15支试管，每支试管加5 m L的备用汁液。备用汁液的p H值被调节至预设值，使用恒温水浴锅进行浸泡一定时间，在不同的温度下提取木薯叶蛋白一定的时间，静置至沉淀，锅中的水需保持在试管液面以上，同样步骤进行3次重复。上述处理后，3 000 r/min离心10 min，除去上层清液，加入蒸馏水1 m L，轻甩试管直至沉淀均匀，加入考马斯亮蓝溶液5 m L，静置5 min，放入紫外分光光度计于波长595 nm处进行比色，读取吸光度，根据考马斯亮蓝法测定木薯叶粗蛋白含量。