《表1 EBI3与P35引物序列》

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《血清IL-35与抗PPD抗体在活动性肺结核中的诊断价值》

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抽取所有患者晨起静脉血3 ml，离心处理后保留上清液待测。血清IL-35水平应用酶联免疫吸附法予以测定，参照试剂盒中附加说明书进行测定。静脉血离心后保留血浆，应用Ficoll淋巴细胞分离液处理进行密度梯度离心法获得外周血单个核细胞，测定IL-35亚基EBI3与P35 m RNA水平，外周血单个核细胞应用Trizol试剂获得总RNA，在进行反转录之后在ABI7500型号荧光定量PCR仪上进行SYBR Green实时定量反转录聚合酶链式反应以测定IL-35亚基EBI3与P35 m RNA水平，引物序列见表1。循环条件：95℃以及30℃进行40个循环，95℃5 s，30℃34 s。亚基EBI3以及P35水平m RNA相对表达量表示方式为对应检测m RNA与磷酸甘油脱氢酶m RNA值之间比值。抗PPD-Ig G应用胶体金免疫层析法进行测定，测定步骤按照试剂盒说明书进行测定。