《表1 β-actin、IL-12 p35、p40基因的引物序列》

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《高表达IL-12卵巢癌细胞的建立》


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按照1.2.2的操作收集病毒感染48 h后的三组SKOV3细胞,先使用总RNA提取试剂Trizol提取SKOV3细胞的总RNA,然后将RNA逆转录为cDNA,以此为反应模板在PCR仪上进行聚合酶链反应,扩增内参基因β-actin、IL-12p35、p40基因,扩增基因时先在GeneBank中查找β-actin、IL-12 p35、p40的基因序列,分别是NM_001101.3,NM_000882.3和NM_002187.2,然后根据基因序列设计合成相应的引物,见表1。扩增反应完成后立即将产物收集起来进行琼脂糖凝胶电泳,采用的是浓度为2.5%的凝胶进行电泳,电泳条件是180 V电泳15 min,电泳完成后在凝胶成像仪下观察三组基因的扩增情况并拍照,采用Quantity One软件对电泳的条带进行分析。