《表1 新生血管相关基因PCR扩增用引物》

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《自制血管保护套联合负压封闭引流治疗兔下肢血管裸露创面的实验研究》

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注：VEGF为血管内皮生长因子；PDGF为血小板衍生生长因子；CD31为血小板内皮细胞黏附分子1；ephrin B2为酪氨酸激酶受体EPH亚族的配体

采用RT-q PCR法检测创面组织。切取创面组织及创缘2 mm正常皮肤，按照Trizol试剂盒（大连宝生物工程有限公司）说明从组织标本提取RNA，用紫外分光光度计检测提取到的RNA浓度。使用Revert Aid First Strand c DNA合成试剂盒（美国Thermo Scientific公司）合成c DNA。采用SYBR R Green Realtime PCR Master Mix（日本TOYOBO公司）试剂盒进行RT-q PCR，由杭州赫贝科技有限公司完成。每个反应使用0.5μl c DNA样品。所有反应均在ABI 7500 Fast仪器上进行，并通过ABI Relative Quantification Study software（美国Applied Biosystems公司）进行分析。PCR反应设立阳性对照组，并用双蒸水作为c DNA的阴性对照。以管家基因β-actin作为内参，并经过至少3次独立分析验证。基因相对表达量采用2-ΔΔCT进行计算，所使用的引物见表1。