《表1 外泌体的提取方法总结》

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《外泌体对骨愈合作用的研究进展》

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目前，外泌体提取方法较多，方式各具特色[37-40]。提取外泌体的方法、具体提取原理及其优缺点见表1。通常采用以下方法鉴定所提取的外泌体。第一种是电镜下直视外泌体的形态。将提取所得的外泌体溶液滴加至100目载样铜网上，静置于室温中1 min，后滴加染色剂（磷钨酸钠溶液或乙酸双氧铀溶液），染色1 min后即可观察。第2种是免疫学方法。采用流式细胞术、Western blot、ELISA等方法检测外泌体表面特异蛋白膜，如转运融合蛋白、热休克蛋白、CD9、CD63等，根据测定抗原抗体复合物上的特殊标记的量即可得知所检测外泌体量。另外还可以采用PCR法、原子力显微镜、图像流技术等[41]。目前方法较多，研究中常常会采用2～3种方法联合测定，保证外泌体的纯度。