《表2 不同病毒感染细胞外泌体的纯化方法》
近年来研究外泌体的热潮只增不减。然而迄今为止,有关外泌体调控病毒感染宿主细胞的机制研究占比较少,主要原因在于学者们面临如何高效、便捷地将外泌体与病毒粒子分离开来并同时保留外泌体生物活性的技术瓶颈。由于病毒与外泌体的大小相近,通过超速离心法、聚合物沉降法、凝胶排阻法等分离未感染细胞的外泌体(后简称“未感染外泌体”)的方法来分离感染细胞的外泌体(后简称“感染外泌体”),得到的产物往往是外泌体与病毒粒子掺杂在一起的混合物[43-44]。现已证明,联合使用密度梯度离心或免疫磁珠吸附的方法可以从混合物中纯化出感染外泌体(表2)。密度梯度离心法的使用成本较低,但存在耗时久、介质洗脱困难等问题;而免疫磁珠由外泌体标记蛋白(CD63或CD81)的抗体包被,可以特异性吸附外泌体,因此通过该法获得的外泌体的纯度高,然而也存在抗体对于不同物种来源的外泌体可能不通用以及磁珠处理通量小等问题[44]。外泌体的纯化方法有待进一步优化。目前,建立病毒感染细胞模型的技术已经十分成熟,纯化外泌体有助于建立内化感染外泌体的细胞模型,以便开展病毒感染宿主细胞的机制研究,为探索阻断病毒感染的防控机制奠定理论基础。
图表编号 | XD00225184400 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.09.25 |
作者 | 朱依凡、于少雄、仇华吉、王翀 |
绘制单位 | 华南农业大学动物科学学院国家生猪种业工程技术研究中心广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室、华南农业大学动物科学学院国家生猪种业工程技术研究中心广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室 |
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