《表1 引物序列表：中脑过表达突变型A53T α-Synuclein增加血脑屏障通透性的研究》

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《中脑过表达突变型A53T α-Synuclein增加血脑屏障通透性的研究》

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携带反式激活蛋白tTA的Pitx3-tTA小鼠（Pitx3小鼠）和携带有人源A53T SNCA基因的te?tO-A53T转基因小鼠（A53T小鼠）均由美国独立卫生院NIH提供，两种小鼠均保持C57BL/6J品系背景。将Pitx3小鼠和A53T小鼠进行交配可获得四种基因型的小鼠:Pitx3小鼠、A53T小鼠、nTg小鼠和Pitx3/A53T小鼠。本实验所用小鼠为nTg小鼠和Pitx3/A53T小鼠，所有小鼠均在SPF级条件下饲养，严格遵守中山大学实验动物伦理准则。待交配获取的小鼠长至21 d时，剪取2-3 mm鼠尾进行基因型鉴定，加入150μl鼠尾裂解液和7.5μl蛋白酶K，55℃水浴锅内过夜，取上清DNA即可用于PCR鉴定。PCR引物由InvitrogenTM公司合成，引物序列见表1。PCR反应条件为95℃5 min；95℃30 s、63℃60 s、72℃60 s，循环35次；72℃延伸5 min。取PCR产物经2%琼脂糖凝胶电泳。