《表2 对微卫星引物的特征描述》

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《基于微卫星标记的真鲷放流群体与增殖海域群体遗传变异比较分析》

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选取多态性较高的7对微卫星引物进行扩增，每对引物的5’端分别用TAM、FAM和HEX 3种荧光标记，具体引物信息见表2。PCR反应总体积为25μL，其中包括10×PCR Buffer 2.5μL，d NTPs 2μL，双向荧光引物各1μL，Taq DNA聚合酶0.15μL，去离子水17.5μL。PCR反应条件为:94℃预变性5 min；94℃变性50 s，在引物特定的退火温度下退火50 s，72℃延伸1 min，循环35次；最后72℃延伸10 min。制备1.5%琼脂糖凝胶（含Du Red染料）对PCR产物进行电泳检测，筛选出扩增成功的产物送至生物公司进行毛细管电泳检测，Gene Marker2.2.0软件收集各位点等位基因数据，然后进行人工校正。