《表1 两对微卫星引物特征Tab.1 Two pairs of microsatellite primers’characteristics》

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《尼罗罗非鱼1号染色体分离及文库构建方法研究》

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以1号染色体扩增产物为模板，基因组DNA为阳性对照，使用已在尼罗罗非鱼基因组上定位的两对微卫星引物UNH971和UNH106进行PCR检测（表1）。PCR反应体系含1μL模板、0.4μL（10mmol/L）d NTP、1 U Taq酶、1.5μL（5 mmol/L）引物、2μL 10×Buffer，用无菌水补足20μL。PCR反应程序为:95℃预变性5 min、95℃变性30 s、58℃退火30 s、72℃延伸30 s，共35个循环:72℃延伸10 min。反应完毕后，1%的琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物。