《表1 11对微卫星引物特征》

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《湖栖鳍虾虎鱼微卫星DNA标记的开发与群体遗传多样性分析》

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利用天根生化科技（北京）有限公司的海洋动物组织基因组DNA提取试剂盒（DP324）提取样本肌肉基因组DNA。实验用4个野生群体各6尾个体对50对引物进行初筛，PCR扩增总体系为10μl，包括PCR Mix 5μl，上下游引物（5μmol/L）各0.5μl，DNA模板0.5μl（86 mg/L），无菌去离子水补齐至10μl。PCR反应程序为：94℃预变性3 min；94℃变性30 s，退火（温度见表1）30 s，72℃延伸30 s，30个循环；72℃后延伸5 min。PCR产物在浓度为8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶中分离，银染显色，等位基因大小以20 bp DNA Ladder Marker为参照标准进行判读。以出现清晰主带为标准，筛选多态性引物，及引物最适退火温度。