《表4 荧光定量20μL的反应体系》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《乳山长牡蛎（Crassostrea gigas）的抗性基因表达和生存环境的季节差异》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

反转录完成后，将所得c DNA稀释20倍作为q RT-PCR的模板，以EF-1α作为内参基因，定量实验选择的目的基因。定量前期准备过程全部在超净工作台冰盒上进行，所用试剂参考2×SYBR Green PCR试剂盒（Takara，Japan）说明书，总体积20μL的反应体系见表4。各步骤完成后使用低温离心机2 000 r左右转速将管壁上的液体甩下混匀。荧光实时定量PCR在仪器ABI 7500 Fast Realtime (Thermal Cycler Applied Biosystems，Foster City，CA，United States）中进行。设置反应参数为：95℃预变性30 s，循环一次；95℃变性5 s，60℃退火30 s，循环40次。PCR完成后将测得的数据导出，定量结果分析采用2-ΔΔCt法。