《表4 荧光定量PCR反应体系》

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《不同油脂饲料对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的影响》


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将上述c DNA进行5倍稀释,以此为荧光定量PCR的模板,SYBR Premix Ex TaqTM试剂盒说明书作为反应体系参考,具体反应体系(表4)。所用内参为中华绒螯蟹β-actin基因。q PCR反应在美国Applied Biosystems公司7500实时荧光定量PCR仪中进行。反应条件为两步法PCR扩增标准程序:95℃预变性30 s;95℃5 s,60℃(FAD6,FAD9)或60.3℃(FAD6b,ELOVL6) 34 s,共扩增40个循环;溶解曲线分析程序分别为:95℃15 s,65℃60 s,95℃30 s。