《表2 抗性基因和转移元件所需的引物序列》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《不同污泥在微波预处理-厌氧消化过程中抗性基因分布及菌群结构演替》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

采用试剂盒Fast DNA Spin Kit for soil提取污泥基因组DNA，用Nanodrop 2000（Thermo Scientific，USA)测定DNA浓度和质量，将提取的DNA样品于-80℃冰箱保存备用．采用荧光定量PCR（q PCR）定量分析ARG与16S rRNA基因，具体包括β-内酰胺类抗性基因blaTEM、blaCTX-M和blaNDM-1，大环内酯类抗性基因erm B、erm F和mef A/E，喹诺酮类抗性基因qnr A和qnr S，四环素类抗性基因tet A、tet M和tet X，磺胺类抗性基因sulⅠ和sulⅡ，整合子int I1及转座子Tn916/1545．引物信息如表2所示．PCR反应体系为20μL，包括SYBRPremix Ex TaqTM（Tli RNase HPlus）（TAKARA）10.0μL，引物F为0.4μL，引物R为0.4μL，DNA模板5.0μL和RNasefree(Ambion）水4.2μL．荧光定量PCR反应条件为:（1）50℃，2 min；（2）95℃，30 s；（3）95℃，15 s；（4）退火，20 s；（5）72℃，30 s；（6）Plate read，重复（3）～（5），39次重复；（7）Melt-curve分析:60℃至95℃，使用无菌水作为阴性对照，每隔0.2℃采集生成溶解曲线．将扩增产物用1%的琼脂糖凝胶电泳进行分析．