《表1 PCR引物序列:抗生素抗性基因在两级废水处理系统中的分布和去除》

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《抗生素抗性基因在两级废水处理系统中的分布和去除》


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本研究选择了8类共27种ARGs进行定性检测,具体包括7种四环素类ARGs(tet A、tet B、tet C、tet M、tet O、tet Q、tet W),4种磺胺类ARGs(sulⅠ、sulⅡ、sulⅢ、sul A),3种甲氧苄啶ARGs(dfr A1、dfr A12、dfr A13),3种β-内酰胺类ARGs(amp C、bla SHV、bla PSE-1),2种大环内酯类ARGs(erm A、erm B),3种氯霉素类ARGs(catⅠ、catⅡ、floR),2种氨基糖苷类ARGs[aac(3)-Ⅱa、aac(3)-Ⅳ]和3种万古霉素ARGs(van A、van B、van C).所用的引物序列和片段大小见表1.本实验所使用的引物均由生工生物工程(上海)股份有限公司合成.普通PCR采用25μL体系,包含12.5μL Premix Ex TaqTMHot Start Version(Ta KaRa,中国);各1μL的上、下游引物;1μL的DNA模板;9.5μL dd H2O.PCR反应程序为:95℃预变性3 min;94℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸60 s,共35个循环;最后于72℃延伸10 min.PCR产物置于4℃保存,并使用质量浓度为1%~2%的琼脂糖凝胶电泳进行检测.