《表3 SRAP正反引物序列Table 3 Sequences of SRAP forward and reverse primers》

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《一串红新品种红运的选育与SRAP鉴定》


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一串红SRAP-PCR体系为:1×PCR缓冲液、2 mmol/L Mg C12、0.2 mmol/L d NTPs、0.4μmol/L引物,50 ng模板DNA和1 U Taq DNA聚合酶,用无菌水补足至25μL。其中引物根据Li等(2001)的设计原则,设计正反向引物各8条(表3)。扩增程序为:94℃5 min;94℃45 s,35℃1 min,72℃1 min 30 s,共5个循环;94℃45 s,50℃1 min,72℃1 min 30 s,共35个循环;72℃延伸10 min,4℃保存。扩增产物参照Bassam等(1991)的方法,采用8%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,110 V恒压约120 min,银染显影(方卫国等,2000)。引物合成和相关试剂均购自上海生工生物工程有限公司。