《表1 正向和反向引物的序列Tab.1 Sequence of forward and reverse primers》

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《eEF1A1通过正向调控NOB1的表达促进肝癌细胞的侵袭和转移》

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收集培养48 h后的肝癌细胞（MHCC97h、HCCLM3、Hep3B和SMMC7721细胞）和HL-7702正常肝细胞；分别收集sheEF1A1-1干扰组、sheEF1A1-2干扰组、shNC对照组和pcDNA3.1-eEF1A1过表达组、pcDNA3.1-vector对照组的MHCC97和HCCLM3细胞。采用TRIzol法抽提各组细胞的总RNA，紫外分光光度计检测并计算总RNA纯度并定量，电泳检测总RNA的完整性。按TaKaRa PrimeScript?RT reagent Kit with gDNA Eraser说明书提供的流程进行反转录制备cDNA，并以此为模板，采用SYBRPremix Ex TaqTM试剂盒在ABI PRISM7500自动荧光PCR仪进行荧光定量PCR检测eEF1A1和NOB1以及内参GAPDH的mRNA表达水平，每个样品均设置3个复孔，设定阈值，测定平均的Ct值。引物序列示于表1中。