《表5 SSR引物信息表Table 5 SSR primer information》

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《基于SSR标记的黄精品种(系)DNA指纹图谱库构建》


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SSR引物序列源于黄精转录组数据库,筛选黄精多糖代谢合成途径中关键酶基因的SSR位点,利用Premier 5.0软件设计引物,合成(北京奥科鼎盛生物科技有限公司)。筛选出的多态性丰富的SSR引物列表(表5)。以不同黄精种质DNA为模板,利用eppendorf PCR仪扩增,扩增体系为20μL,其中2×PCR master Mix 10μL,Primer-F(20μmol/L)0.5μL,Primer-R(20μmol/L)0.5μL,Template DNA(total DNA)(25 ng) 1μL,最后用dd H2O补足至20μL。PCR反应程序如下:94℃预变性4 min;94℃变性40 s,62℃退火30 s,72℃延伸40 s,36个循环;72℃延伸10 min,4℃保存。