《表1 供试SSR引物Table 1 SSR primers used in identification experiment》

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《单叶刺槐半同胞子代苗期性状变异分析》


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刺槐的SSR标记已经开发并用于其他相关物种[20-21]。本试验中SSR扩增所需要的引物来自Gene Bank和文献[15-16]中,由上海生工生物工程有限公司合成。通过凝胶电泳分析,最终筛选出13对多态性高、条带清晰、重复性高的引物用于试验检测(表1)。PCR扩增采用10μL体系:buffer 1μL,dNTP 0.2μL,正引物、反引物各0.2μL,Taq酶0.1μL,ddH2O 7.3μL,DNA1μL,PCR扩增程序为:95℃预变性10 min;35个循环(95℃50s,56℃50s,72℃50s);72℃7min。PCR产物用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳,银染显色后拍照并记录。