《表2 FADV-4 hexon基因荧光定量PCR引物浓度优化结果》

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《血清4型禽腺病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立及初步应用》

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通过矩阵法优化引物探针浓度得出，引物浓度为0.20μmol/L，探针浓度为0.10μmol/L时检测效果较好，统计学分析，其CT值变异系数CV%较低，不超过1%（表2、3），表明该引物探针浓度批内重复性较好。本试验建立的反应条件为：Platinum?Quantitative PCR Super Mix-UDG 10μL，上下游引物各0.20μL，探针0.10μL，模板2μL，水7.50μL，总反应体系为20 ul，50℃2 min，95℃2 min；95℃3 s，60℃30 s，40个循环。