《表1 PKCθ和Spartin引物序列》

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《尼罗罗非鱼PKCθ蛋白和Spartin蛋白的原核表达、抗体制备及其组织表达》

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根据大肠杆菌密码子的偏好性，将尼罗罗非鱼PKCθ基因（NCBI No.XP＿005475922.1）与Spartin基因异构体X1序列（NCBI No.XP＿029373409.1）翻译成核酸序列，根据核酸序列利用Primer Premier 5.0软件设计特异性引物（表1），引物5′端添加一段载体同源性序列，引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。PCR扩增条件如下：94℃4 min；94℃45 s，52℃45 s，72℃45 s，28个循环；72℃10 min。琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物，之后用DNA回收试剂盒（天根生化科技有限公司）进行切胶回收。