《表1 引物和DNA序列》

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《含心脏阿霉素反应蛋白基因的重组慢病毒过表达和RNA干扰载体的构建及鉴定》


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根据siRNA的设计原则,使用美国Ambion公司的在线软件(http://www.ambion.com/techlib/misc/siRNAfinder.html),在CARP开放阅读框区域选择5′-AAACTGCCAGTTGTAGAGAAA-3′作为干涉靶序列,并通过BLAST同源性比较。设计发夹结构siRNA的正义链和反义链,每条寡核苷酸链包括:2个反向互补排列的19nt特异性序列,两端的AgeⅠ和EcoRⅠ酶切位点,RNA聚合酶Ⅲ转录终止信号TTTTTG以及1个6nt茎环结构间区。引物序列见表1。