《表1 引物序列和产物长度》

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《氯化锂对地塞米松诱导的大鼠胰岛β细胞凋亡的影响及其机制》

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将INS-1细胞接种于6孔板中，每孔细胞数约为3.8×105个。培养24h待细胞贴壁后换成相应的条件培养基收集细胞，按照试剂盒提取细胞总RNA，测定核酸浓度后按照Promega逆转录试剂盒说明进行操作，将提取的总RNA逆转录为cDNA。反应条件：逆转录反应（42℃、60min），灭活酶活性（95℃、5min），之后进行Real-time PCR。95℃预变性1 min，94℃、15s，60℃、30s，72℃、30s，40个循环。反应结束后，确认Real-time PCR的扩增曲线和熔解曲线，以2-ΔCt方法计算SOD、iNOS、Nox4和p47phox mRNA表达水平。PCR反应的引物序列和产物长度见表1。