《表1 RT-PCR引物序列》

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《脂多糖滴鼻对新生小鼠肺微血管发育的影响》


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取小鼠肺组织50~100 mg,Trizol法提取总RNA,并在RNA/DNA机上检测其浓度和纯度,采用Takara逆转录试剂盒逆转录合成cDNA进行PCR扩增。引物由北京华大基因公司合成,引物序列见表1。反应条件:95℃预变性30 s,95℃变性10 s,不同退火温度30 s,反应40个循环。采用相对定量法,检测目的基因及GADPH的RT-PCR产物的Ct值,利用公式2-△△Ct计算各基因的相对表达量,重复3次。