《表4 PIK3R1的3'UTR报告载体测序结果》

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《miRNA-455-5p对人结肠癌HT-29细胞株PIK3R1基因靶向调控作用的研究》

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构建PIK3R1的3′UTR报告载体（包括野生型和突变型载体）：CL1011-1-PDS162＿psicheck3-gluc-＿PIK3R1-3′UTR-WT＿-fluc；CL1011-2-PDS162＿psicheck3-gluc-＿PIK3R1-3′UTR＿-MUT-fluc，结果测序验证正确，见表4。本实验荧光素酶切位点位于XhoⅠ/NotⅠ，见图3。转染293细胞48h后，阳性对照组、wt-455-5P-mimic组、wt-mim- ics-NC组、mut-455-5p-micmics组、mut-mimics-NC组Gluc/Fluc值分别为11.52±0.38、5.66±0.16、9.42±0.36、9.10±0.35、9.42±0.36，其中wt-455-5P-mimic组明显低于wt-mimics-NC组（P<0.05），见图4；说明hsa-miRNA-455-5p能与PIK3R1基因的3′UTR结合，降低PIK3R1蛋白的翻译水平。