《表1 miR-1266与SCN5A 3'UTR的预测结合位点》

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《微小RNA-1266对钠通道蛋白表达和分布的影响》


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注:上排为SCN5A 3'UTR;下排为miR-1266

根据Targetscan软件预测和双荧光素酶系统报告miR-1266与SCN5A 3'UTR的结合位点(表1),含有3段预测结合位点的SCN5A3'UTR的部分序列如下:TCACTGCCCAGGGGT-CGAATGGGGTCCCCCTCCCACTTGA-CCTGA-GA-TGCTGGGAGGGCTGAACCCCCACTCACA-CAAGCA-CACACAGGGCTGAGCCATGGGGGT-TTGGGGCTA-AGAAGTTCACCAG-CCC-TGAG-CCATGGCGGC-CCCTCAGCCTGCCTGAAGAGA-GGAAACTGGTATT-TAGCATATGCAAATCT-TTTAACATAGAGAACTGT-CA-CC-CTGAG-G-TAACAGGGTCAACTGGCGAAGC-CTGAGCAG-GCAGGGGCT。应用同源重组技术将合成片段插入待构建载体中XbaⅠ酶切位点(TCTA-GA)处,改建为pcDNA3.1-SCN5A 3'UTR质粒,阴性对照质粒为不含预测结合位点的pcDNA 3.1-SCN5A质粒。