《表1 实时定量PCR引物序列1)》

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《植物激素对微拟球藻油脂及二十碳五烯酸积累的影响》


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注:1) 18s为18SrDNA;Fas为脂肪酸合酶;Δ5,Δ6,Δ9,Δ12为Δ5,Δ6,Δ9,Δ12去饱和酶;Acc为乙酰辅酶A羧化酶;Dgat为二酰甘油酰基转移酶;EL1,EL2为延长酶1和延长酶2.

通过实时定量PCR进一步检测油脂合成相关基因的表达水平.根据基因组测序数据设计引物序列(表1).使用试剂盒RNeasy Mini Kit(QIAGEN,Germany)提取总RNA.使用Revert Aid First Strand cDNA Synthesis Kit(Thermo scientific)逆转录试剂盒逆转录总RNA.反转录的体系:5μg总RNA,1μL Oligo dT,1μL随机引物,4μL 5×buffer,1μL RiboLock RNase Inhibitor,1μL Revert Aid Reverse Transcriptase,用RNAase free water补齐20μL体系.25℃,5 min;42℃,1h;70℃,5min.