《表1 RT-PCR引物序列》

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《基于JAK2/STAT3/SOCS3信号通路探讨复方甘草酸苷对实验性自身免疫性脑脊髓炎的防治作用》

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各组小鼠在第30天处死，取大脑组织约100mg，用TRIpure试剂分离得到总RNA，用EntiLinkTM1st Strand cDNA Synthesis Kit试剂盒（ELK Biotechnology，EQ003）按照制造商的说明逆转录成cDNA。设计针对JAK2、STAT3、SOCS3、RORγt及Foxp3的引物（所有引物均由武汉金开瑞生物工程有限公司合成，见表1，在StepOneTMReal-Time PCR仪(Life technologies公司）上扩增基因片段，每个样品均作3个复孔。反应在95℃热启动3 min，然后在95℃进行10 s（变性）、58℃进行30 s（复性）和72℃进行30 s（延伸），变性、复性、延伸三个过程循环40次。以GAPDH为内部参数，通过2-ΔΔCT方法计算基因含量的相对表达。