《表1 菜豆中参与叶绿素生物合成的酶及编码基因在菜豆基因库中的注释》

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《菜豆金黄荚色产生的生化机制研究》


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使用植物总RNA提取试剂盒(天根,中国)提取嫩荚荚壁中总RNA,进行反转录(天根,中国)合成cDNA第1条链。根据拟南芥中叶绿素合成途径相关基因的注释,在菜豆基因库中查找同源基因。以同源基因中CDS序列为模板,用Premier 6.0设计特异性引物(表1),以cDNA为模板用qRT-PCR试剂盒(天根,中国)进行荧光定量。qRT-PCR反应程序为:热启动95℃3 min,95℃5 s、60℃15 s进行扩增,熔解曲线程序为95℃30 s、65℃30 s、95℃30 s。内标选用肌动蛋白基因(Actin)。