《表1 IL-6 TLR4 PI3KA和β-actin引物序列信息》

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《二妙散对类风湿关节炎调控基因Toll样受体4和重组牛磷酸肌醇3激酶A表达的影响》


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根据NCBI GenBank已登录的大鼠IL-6、TLR4、PI3KA和β-actin cDNA序列,利用Prime Premier 5.0软件分别设计特异性引物4对,由北京擎科新业生物技术有限公司合成引物序列(表1)。使用15μl PCR反应体系:正反向引物(10μmol/L)各0.6μl、cDNA模板0.8μl、ddH2O 5.5μl、2×M5HiPerTaq PCR mix(with Green Dye)7.5μl。反应条件:94°C 3 min,94°C 30 s,60°C 30 s,72°C 30 s,30个循环;72°C 5 min,产物经2.0%琼脂糖凝胶电泳检测。