《表1 用于GFHNV检测的引物信息》
对GenBank中登录的CyHV-2的helicase基因序列(参照GenBank Accession AFJ 20501)进行比对,依据RAA引物设计原则,采用DNAman 6.0软件进行序列比对分析,选取同源性高的片段,用primer 5.0进行引物设计(表1)。以pUC57-CyHV-2标准质粒(8×105拷贝/μL)作为模板,对RAA引物进行筛选。扩增反应参照试剂盒说明书进行。反应条件采用37℃孵育10 min,反应结束后经1.5%琼脂糖凝胶电泳检测RAA产物。选择扩增条带单一的1对引物,对上、下游引物5’端分别用异硫氰酸荧光色(FITC)和生物素(Biotin)进行标记,合成与标记由上海生工生物工程技术服务有限公司完成,标记后的引物用于后续的方法建立。
图表编号 | XD00174878000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.06.20 |
作者 | 王姝、吕晓楠、徐立蒲、张文、王静波、王小亮、曹欢 |
绘制单位 | 北京市水产技术推广站、北京市水产技术推广站、北京市水产技术推广站、北京市水产技术推广站、北京市水产技术推广站、北京市水产技术推广站、北京市水产技术推广站 |
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