《表1 PI染色死细胞条件优化》

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《高通量筛选地衣芽孢杆菌DW2高产杆菌肽诱变菌株》

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优化PI染色死细胞条件的结果如表1所示。随着PI溶液体积的增加和避光染色时间的延长，阳性信号的比例逐渐增加。而当PI储液体积大于40μL且染色的时间超过20 min时，阳性信号的比例不再增加或明显增加。另外，为避免PI染色诱变后的活细胞，将PI染色死细胞的条件确定为100μL细胞溶液与40μL的PI溶液在200μL的体系中置冰上避光染色20 min。最后通过优化的染色条件和设置合理的圈门方案，将细胞分选至96孔板中，可在固体培养基上观察到生长出单菌落（图4）。经过实践检验，此分选方案可使细胞的回收率平均达95%以上。