《表1 引物信息：3种转染试剂对牛原代骨骼肌卫星细胞转染条件的优化》

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《3种转染试剂对牛原代骨骼肌卫星细胞转染条件的优化》

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通过NCBI Primer-BLAST在线软件设计引物（表1），进行普通PCR验证引物特异性。PCR反应体系20μL:2×Es Taq MasterMix 10μL，上、下游引物各1μL，cDNA 1μL，ddH2O 7μL。PCR反应条件:95℃预变性5min；95℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸30s，35个循环；72℃延伸10min。引物经普通PCR验证后进行实时荧光定量PCR。PCR反应体系20μL:2×All-in-OneTMqPCR Mix10μL，上、下游引物各0.5μL，cDNA 2μL，RNasefree dH2O 7μL。PCR反应条件:95℃预变性10min；95℃变性10s，60℃退火20s，72℃延伸15s，40个循环。以GAPDH作为内参基因，通过2-△△Ct方法计算基因的相对表达水平。